As células-tronco embrionárias (ESCs) são células pluripotentes com capacidade de se diferenciar in vitro e in vivo em tecidos dos três folhetos germinativos. Entretanto o uso terapêutico das ESCs ainda é limitado devido a problemas na obtenção destas células para transplantes autólogos e no controle da sua diferenciação celular. Em vista disso a proposta do NUCEL (Núcleo de Terapia Celular e Molecular) visa obter células pluripotentes originadas pela reprogramação de células somáticas diferenciadas do próprio indivíduo receptor. Estas células são conhecidas como iPSCs (induced pluripotent stem cells) e tem como caracteristíca a expressão de fatores de transcrição específicos responsáveis por sua capacidade de pluripotência. Outro aspecto importante das iPSCs é que estas células podem ser obtidas por métodos que envolvem a modificação gênica das células somáticas do indivíduo receptor causando a incorporação de sequências indesejadas dos vetores utilizados na transformação destas células, podendo resultar no surgimento de tumores ou resistência a antibióticos. Com base nestas informações vê-se necessário o desenvolvimento de novas metodologias para a obtenção de iPSCs e a realização de ensaios de terapia celular para avaliar a segurança e eficácia do uso terapêutico destas células. Este projeto visa obter as iPSCs com protocolo já conhecido para poder comparar com os demais métodos a serem desenvolvidos. Para isso serão clonadas as sequências dos genes humanos para os fatores de transcrição responsáveis pela reprogramação das células (Oct-4, Sox-2, c-Myc e Klf-4) em vetor lentiviral seguida da transdução de células-tronco mesenquimais (CTMs) de epiderme humana e murina. Outro objetivo do projeto é obter as iPSCs utilizando protocolo que não envolve a modifica gênica das CTMs. Neste método serão produzidas células que expressão e secretam os mesmos fatores de transcrição comentados anterioremente, mas agora fusionados com um domínio de transdução de proteína (PTD), o qual permite a entrada na célula e posterior endereçamento ao núcleo destes fatores de transcrição, local onde estes fatores irão atuar no processo de reprogramação das células-tronco mesenquimais. Os resultados obtidos com este estudo podem auxiliar no desenvolvimento de novas metodologias para terapias a partir de células-tronco do próprio paciente. Além de propiciar um melhor entendimento dos mecanismo envolvidos na pluripotencialidade das céluas-tronco.