A hemofilia A é uma doença hereditária ligada ao cromossomo X, incidindo quase que exclusivamente em indivíduos do sexo masculino, com uma freqüência mundial de cerca de um em cada 5.000 homens. A hemofilia A esté relacionada à deficiência da atividade do Fator VIII de coagulação sangüínea, podendo ser causada por mutações, deleções e/ou inserções no locus cromossômico deste fator (Oldenburg et al., 2004). Os portadores de hemofilia A apresentam um aumento significativo no tempo de coagulação, o que leva a uma tendência hemorrágica anormal e à necessidade da reposição deste fator para o controle destes sintomas. As principais fontes de Fator VIII para a terapia de reposição são os concentrados de Fator VIII, obtidos a partir de plasma de doadores de sangue, e o Fator VIII humano recombinante. Um dos objetivos do laboratório é o desenvolvimento de recursos científico-tecnológicos visando à produção do fator da coagulação sanguínea VIII humano recombinante. Para se estabelecer um processo de produção de proteínas recombinantes, diversas etapas devem ser implementadas. Uma etapa crucial é o desenvolvimento de uma linhagem celular que produza, de forma estável e em grande quantidade, a proteína recombinante de interesse com características bioquímicas, funcionais e farmacológicas idealmente idênticas à proteína natural. Esse desenvolvimento se inicia com a clonagem do cDNA contendo a região codificadora da proteína de interesse em um vetor de expressão apropriado, e a sua inserção estável no genoma de determinadas linhagens celulares mantidas em cultura. Após esta primeira etapa, medidas adicionais são necessárias para aumentar e otimizar a produção, o que envolve: a) utilização da metodologia de amplificação gênica; b) isolamento de clones celulares super produtores; c) adaptação dos clones celulares super produtores para crescimento em suspensão e em meio de cultura definido (sem soro) e de composição otimizada, visando manter tanto a viabilidade celular como a produção e a estabilidade da proteína secretada para o meio de cultura. Nossa linha de atuação tem se concentrado na obtenção de linhagens celulares de mamífero superprodutoras do Fator VIII humano da coagulação recombinante e a sua caracterização bioquímica e funcional, in vivo e in vitro, como parte do processo de estabelecimento de uma plataforma de produção dessa proteína.