Mecanismos moleculares envolvidos na proliferação e na função secretória de células beta humanas produtoras de insulina.

O transplante de ilhotas pancreáticas isoladas a partir de doadores cadavéricos constitui uma alternativa promissora para o tratamento da DM1, no entanto, este método está limitado em razão da escassez de doadores. A expansão ex-vivo das culturas de ilhotas pancreáticas parece uma estratégia atraente, porém, a manutenção das ilhotas humanas tem sido uma tarefa difícil, uma vez que o destino das ilhotas em cultura é, em parte, determinada pelo balanço entre mediadores pró- e anti-apoptóticos. Além disso, seria interessante dispor de um modelo celular, atualmente inexistente, que seja mais estável e abundante do que as culturas de ilhotas humanas para realização de estudos in vitro aprofundados.

Sendo assim, este projeto possui dois enfoques. A primeira proposta é estudar o papel da prolactina na sobrevida das células beta humanas, uma vez que esultados prévios do nosso laboratório demonstraram um efeito benéfico significativo do tratamento com prolactina humana recombinante (rhPRL) na proliferação e função secretória de culturas primárias de ilhotas humanas. A segunda parte visa o estudo comparativo dos perfis de expressão protéica de ilhotas pancreáticas humanas e de insulinomas humanos mantidos em cultura, utilizando-se um enfoque proteômico de eletroforese bidimensional fluorescente (2-D DIGE), acoplada à espectrometria de massa. Devido à relevância deste modelo como ferramenta para estudar a Biologia destes tumores, assim como desordens na síntese e secreção de insulina, é de grande importância aprofundar a caracterização destas linhagens do ponto de vista molecular.

Gel 2D utilizando o sistema DIGE para análise proteômica. A imagem corresponde a amostras de insulinomas humanos e de culturas primárias de ilhotas pancreáticas humanas marcadas indivualmente com Cy2, Cy3 e Cy5.